Producción CyT
Medicina - Desarrollo de un Nano-Manipulador Molecular para el Estudio del Efecto del Estrés Mecánico en la Involución Mamaria
Congreso
Fecha:
2009Editorial y Lugar de Edición:
Publicación de la Fundación Revista MedicinaISSN:
0025-7680Resumen *
La mecanotransducción es esencial para la funcionalidad de varios tipos celulares. La existencia de diferentes estructuras capaces de transducir señales mecánicas (como integrinas, cadherinas, etc.) y la interacción entre dichas vías es una dificultad a vencer al momento de estudiar la función de una de ellas en particular. Luego del periodo de lactancia, las células del epitelio mamario sufren un proceso de involución por apoptosis que resulta en una glándula con características histológicas similares a las observadas en hembras vírgenes. Se propuso que la inducción de apoptosis es gatillada el estiramiento del epitelio mamario producido por la acumulación de leche. La subunidad b1-integrina cumple un papel fundamental en la morfogénesis y remodelación de la glándula mamaria. Suponemos que b1-integrina participa en el senso de las señales mecánicas que lleva a la activación de factores que promueven la apoptosis en el epitelio acinar mamario durante las primeras fases del proceso de remodelación. Con el objetivo de estudiar el proceso de mecano-transducción a escala molecular en células epiteliales mamarias, nos proponemos desarrollar un nano-manipulador molecular para el estudio en células epiteliales mamarias en cultivo. Para esto se amplificó por PCR la región codificante de b1-integrina y se clonó en el vector de expresión pCDNA3.1-zeo para luego insertarle en la región extracelular una secuencia consenso de reconocimiento para la fosfopanteteinil-transferasa ACP. Esta proteína transfiere residuos 4?-phosphopanteteinilo desde la coenzima-A a una serina en la secuencia consenso. Se transfectarán células en cultivo con la construcción anteriormente descripta y se marcaran utilizando biotina-CoA como sustrato para ACP. La utilización de esta técnica permite la marcación específica de la proteína recombinante. Esta metodología podrá aplicarse utilizando Q-dots, microesferas de magnetita o la micro-aguja de un microscopio de fuerza atómica ligados a estreptavidina tanto para la detección como para la aplicación de fuerzas sobre dicha molécula. Información suministrada por el agente en SIGEVAPalabras Clave
MecanotransduccionIntegrinaMicroscopiaNanotecnologia