Producción CyT
Congreso
Autoría
Fecha
2015
Editorial y Lugar de Edición
Comisión de Investigaciones Científicas
Resumen
Información suministrada por el agente en
SIGEVA
Evaluar la solubilidad del calcio a pH neutro o alcalino es una forma de predecir su biodisponibilidad. La mayoría de la absorción mineral ocurre en el intestino delgado, pero el incremento gradual del pH desde 5,5 en el duodeno proximal hasta 7,5 en el ileum terminal la desfavorece. El caseinomacropéptido (CMP) es un péptido bioactivo altamente soluble obtenido del suero de queso. El CMP presenta características únicas, entre ellas, su autoensamblaje e...
Evaluar la solubilidad del calcio a pH neutro o alcalino es una forma de predecir su biodisponibilidad. La mayoría de la absorción mineral ocurre en el intestino delgado, pero el incremento gradual del pH desde 5,5 en el duodeno proximal hasta 7,5 en el ileum terminal la desfavorece. El caseinomacropéptido (CMP) es un péptido bioactivo altamente soluble obtenido del suero de queso. El CMP presenta características únicas, entre ellas, su autoensamblaje en condiciones ácidas (pH < 4,5). Sin embargo, dicho fenómeno se revierte ante un aumento de pH. El objetivo de este trabajo fue evaluar la solubilidad del calcio en presencia de CMP en buffer fosfato a pH = 8,0 y analizar la variación de dicho parámetro ante la reversibilidad del pH.Se utilizó caseinomacropéptido, BioPURE-GMP® de Davisco Foods International (USA). La muestra en polvo de CMP se disolvió en agua Milli-Q a 10 g/L y se mezcló con una solución de CaCl2 anhidro (0,4 M) hasta alcanzar concentraciones finales de Ca2+ entre 0 - 0,005 M. Las mezclas de CMP y CaCl2 fueron agitadas vigorosamente durante 20 min en buffer fosfato a pH= 8,0 (0,066M). Luego se centrifugaron a una velocidad de 2000 rpm por 20 min a 25 ºC. El calcio sobrenadante de la solución buffer se analizó mediante espectrometría de absorción atómica con un espectrómetro Analyst 200 Perkin Elmer. También se investigó el efecto de la reversión del pH acidificando el CMP hasta alcanzar una valor de pH= 3,5 y luego neutralizándolo hasta pH= 7. Para este propósito se utilizaron diferentes ácidos: ácido clorhídrico, acético, cítrico y láctico de alta normalidad para evitar la dilución. Este análisis se realizó por la técnica de Dispersión Dinámica de Luz Láser (DLS, siglas en inglés) con un equipo Zetasizer Nano-Zs, Malvern Instruments. Se estudió el efecto de la reversibilidad del CMP en un medio con alta concentración de calcio (0,005 M) ajustado a pH = 3,5 por los ácidos clorhídrico y cítrico.Los resultados mostraron que la solubilidad del CaCl2 en buffer fosfato fue muy baja (2,35 ± 0,19 mg/L), y aumentó un 490% (12,43 ± 0,94 mg/L) en CMP y un 200% (5,18 ± 0,54 mg/L) en -lactoglobulina. Dependiendo del tipo de ácido utilizado luego de la reversibilidad por pH, los estados de asociación encontrados no fueron el monómero inicial sino dímeros, tetrámeros y hexámeros. Las interacciones hidrofóbicas entre las moléculas de CMP-CMP fueron más importantes en presencia de ácidos orgánicos (acético, láctico y cítrico). La reversión del pH con ácido clorhídrico y cítrico incrementó la solubilidad a ≈ 36 mg/L, no siendo afectada con los ácidos láctico y acético. Estos resultados se podrían explicar debido a una mayor interacción entre las moléculas de CMP-CMP (obtenida bajo efecto de los ácidos acético y láctico), no afectando la unión del péptido con el calcio. Sin embargo, la presencia de dímeros de CMP (obtenidos con HCl) incrementaron la solubilidad del calcio en 1800%. El efecto revelado por la utilización de ácido cítrico podría adjudicarse a la capacidad de quelar calcio de los iones citrato, como mostraron los estudios de DLS.Este estudio preliminar concluye que el CMP es un efectivo ligante de calcio en condiciones básicas y que ésta puede ser incrementada revirtiendo su pH con ácido clorhídrico o cítrico.
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Palabras Clave
SOLUBILIDADCASEINOMACROPEPTIDO