Producción CyT
InVet - Obtención y caracterización de un cultivo de explantos esferoidales de células oviductales porcinas?
Congreso
Fecha:
2016Editorial y Lugar de Edición:
Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad de Buenos AiresISSN:
1514-6634Resumen *
Los bajos rendimientos en la producción in vivo de embriones han llevado a la necesidad de desarrollar nuevas biotecnologías para su mejoramiento. El oviducto de los mamíferos provee un microambiente esencial y óptimo para el desarrollo apropiado del embrión. Para estudiar interacciones entre el embrión y el oviducto, se desarrollaron diferentes sistemas de cultivos primarios de células epiteliales oviductales cultivadas en monocapas o en suspensión (vesículas esferoidales). Los cultivos de explantos de estas células ayudarían a comprender los mecanismos mediante los cuales el oviducto y los factores producidos por el mismo podrían ejercer efectos, de manera autócrina, sobre las mismas células epiteliales que las producen y/o de manera parácrina sobre los embriones durante su tránsito por el oviducto. El objetivo de este trabajo es obtener y caracterizar cultivos de explantos como vesículas esferoidales de láminas de células oviductales porcinas. Para la realización del cultivo se recolectaron oviductos de ovarios con cuerpo lúteo y se les realizó presión externa suave con porta objetos. La suspensión celular obtenida se pasó por vortex y se dejó decantar en estufa. Las células oviductales y los explantos se sembraron en placas de cultivo con medio DMEM F12, SFB 20%, gentamicina 1000 U/mL y fungizona 1000 U/mL. Como resultado se obtuvo un cultivo mixto de monocapa y de vesículas esferoidales. La monocapa de células oviductales, mostró una organización y orientación definida en forma radial, observándose vacuolas lipídicas negativas con Hematoxilina en su citoplasma. Las vesículas esferoidales (VE) se observaron en suspensión. Asimismo se pudo visualizar que las VE tenían movilidad propia mediante cilias, las cuales se perdieron entre las 48h y 72h post siembra para adherirse y asociarse en algunos casos a la monocapa. Estos resultados se complementarán con técnicas de inmunohistoquímica, a los fines de caracterizar el cultivo de VE. Podemos concluir en relación a la caracterización de las células oviductales que el modelo de VE es potencial de ser utilizado en experimentos que intenten probar la interacción y el beneficio de las células del oviducto con un embrión temprano, extrapolando condiciones similares a las fisiológicas Información suministrada por el agente en SIGEVAPalabras Clave
celulas oviductalese cadherinainmunohistoquimicaporcinos