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Acta Bioquímica Clínica Latinoamericana - Estudio de la megacariocito y trombopoyesis en el sindrome de plaquetas grises (GPS)
Congreso
Autoría:
Glembotsky AC ; Lev PR ; MARTA, ROSANA FERNANDA ; Espasandin YR ; Alvarez C ; Molinas FC ; Heller PGFecha:
2014Editorial y Lugar de Edición:
SciELOISSN:
1851-6114Resumen *
El GPS se caracteriza por macrotrombocitopenia, deficiencia severa de gránulos alfa y evolución a mielofibrosis. Recientemente, se identificaron mutaciones en NBEAL2 como causa molecular de este desorden. La trombocitopenia se debe a menor producción plaquetaria y, en algunos casos, a hiperesplenismo. El mecanismo es poco claro, describiéndose en un modelo de GPS murino, alteración en la megacariocito y trombopoyesis. Para contribuir a esclarecer la patogenia de la trombocitopenia, se estudiaron 2 hermanos con GPS, P1 y P2, edad 72 y 68 años, plaquetas 65 y 30 x109/L, diámetro plaquetario 4.15 y 3.65 (referencia 2.27-3.08) m. Se documentó disminución marcada de gránulos alfa por inmunofluorescencia para trombospondina-1: plaquetas con <5 gránulos, 93% y 96%, respectivamente, vs. 3.1±1% en controles. Ambos presentaron manifestaciones hemorrágicas moderadas y uno (P1), leve esplenomegalia. La biopsia de médula ósea mostró mielofibrosis (grado 2 en P1 y 3, en P2, EUMNET) y extensa emperipolesis. En P1, la sobrevida plaquetaria fue normal. Se identificó la mutación homocigota p.Tyr729* en NBEAL2, confirmándose el diagnóstico de GPS. Se cultivaron megacariocitos a partir de progenitores hematopoyéticos CD34+ de médula ósea purificados por columnas inmunomagnéticas de P2, utilizándose como control (C), médula ósea de un individuo sin patología hematológica. Se estimuló la diferenciación a megacariocito con TPO, SCF e IL-6 en medio libre de suero StemSpan. Al final del cultivo (día 13) la pureza de megacariocitos (CD61+) fue 61% en P2 y 65% en C, siendo la fracción madura (CD61+CD42b+) 45% y 54%, respectivamente, por citometría de flujo. Mediante inmunofluorescencia para el marcador CD61 (GPIIIa) y Hoescht (lobulación nuclear), la distribución de los megacariocitos en estadíos madurativos I, II y III (clasificados de menor a mayor maduración) fue 50, 30, 12% en P2 y 61, 33 y 6% en C, respectivamente, revelando que la megacariocitopoyesis está globalmente preservada. La trombopoyesis se evaluó mediante cuantificación de megacariocitos formadores de proplaquetas en microscopio invertido, siendo 0.2±0.04% en P2 vs. 1.82±0.01% en C. Mientras que las proplaquetas del control presentaron extensa ramificación, las del paciente presentaron menor complejidad. Estos resultados indicarían que la trombocitopenia del GPS se debería a una alteración en la fase final de producción plaquetaria o trombopoyesis, aunque se requiere el estudio de mayor número de pacientes para establecer una conclusión definitiva al respecto. La posible relación entre la disminución de gránulos alfa y la alteración en la trombopoyesis amerita posterior investigación, asi como el rol directo del NBEAL2 en estos procesos. Información suministrada por el agente en SIGEVAPalabras Clave
MEGACARIOCITOSTROMBOCITOPENIASINDROME DE PLAQUETAS GRISESPLAQUETAS