Producción CyT
Congreso
Autoría
Kornblihtt, L
;
Lombardo, T
;
Cavaliere, V
;
Costantino, S
;
Alvarez, E
;
BLANCO, GUILLERMO ARMANDO C.
Fecha
2013
Editorial y Lugar de Edición
SAH
Resumen
Información suministrada por el agente en
SIGEVA
El trióxido de arsénico (ATO) se utiliza como monodroga en el tratamiento de la leucemia promielocítica mientras que el inhibidor de proteasoma (InPr) Bortezomib en mieloma múltiple. Su aplicación a otras neoplasias hematológicas es difícil por las altas dosis requeridas para inducir muerte a las células tumorales y lograr eficacia clínica. Sin embargo, terapias combinadas y dirigidas a blancos moleculares pueden revertir la resiste...
El trióxido de arsénico (ATO) se utiliza como monodroga en el tratamiento de la leucemia promielocítica mientras que el inhibidor de proteasoma (InPr) Bortezomib en mieloma múltiple. Su aplicación a otras neoplasias hematológicas es difícil por las altas dosis requeridas para inducir muerte a las células tumorales y lograr eficacia clínica. Sin embargo, terapias combinadas y dirigidas a blancos moleculares pueden revertir la resistencia y reducir la dosis efectiva. En estudios previos, mostramos que la combinación ATO+ InPr (MG132) resultó antagónica para inducir muerte celular en CLB (línea celular Raji). Ahora exploramos un blanco molecular de resistencia a la inducción de muerte por drogas dependiente del silenciamiento epigenético de BNIP3 (miembro "BH3-only" de familia de proteínas Bcl2) utilizando bajas dosis de ácido valproico (VPA) +VCR para sensibilizar las CLB a la combinación ATO+ InPr Metodología: cultivo de Raji en presencia de:0-20uM ATO, 0-2.5 uM MG132, 1uM azacitidina (AZA) y 3mM valproico VPA (ambas epigenéticas) y 1uM VCR (inhibidor MT) curva dosis respuesta: lectura de la tinción con Ioduro de Propidio como marcador de muerte celular y FDA de actividad metabólica en citómetro de flujo. Las curvas abarcaron de 0-20uM ATO y 0-2.5 uM MG132 para obtener efecto citotóxico de 10-100% en 72 hs Interacción de drogas: por isobolograma y determinación del índice de combinación (CI) por el método de Chou-Talalay (sinergismo(CI<1), aditividad (CI=1) o antagonismo (CI>1) Expresión proteína BNIP3: por inmunofluorescencia con anticuerpo antiBNIP3 Resultados: el silenciamiento epigenético de BNIP3 se revirtió con AZA y VPA. La expresión del BNIP3 se localizó en área perinuclear. La interacción ATO+MG132 en presencia de VPA (dosis subcitotóxica) se mantuvo antagónica. Pero en presencia VPA+VCR, la distribución perinuclear de BNIP3 se desplazó hacia el citoplasma y la interacción ATO+MG132 fue sinérgica Conclusión: CLB, sensibilizadas con bajas dosis de VCR+VPA, presentan sinergismo entre ATO y el InPr permitiendo reducir mucho la dosis de ambas drogas. El mecanismo de resistencia a las drogas, revertido por el VCR+VPA, sería dependiente del BNIP3 y de la red de microtúbulos
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Palabras Clave
Linfoma de BurkittBNIP3arsénicovincristinasilenciamiento epigenético