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MEDICINA - EFECTO PROAPOPTOTICO DE UN NUEVO INHIBIDOR DE LA GTPASA RAC1 SOBRE MODELOS DE LEUCEMIA AGUDA HUMANA
Congreso
Autoría:
ECHEVERRIA EMILIANA ; GOMEZ DANIEL ; DAVIO, CARLOS ALBERTO ; FERNANDEZ NATALIA ; LORENZANO MENNA PABLOFecha:
2012Editorial y Lugar de Edición:
Fundación Revista MedicinaISSN:
1669-9106Resumen *
(492) EFECTO PROAPOPTOTICO DE UN NUEVO INHIBIDOR DE LA GTPASA RAC1 SOBRE MODELOS DE LEUCEMIA AGUDA HUMANA Echeverria, E.1; Gomez, D.2; Davio, C.1; Fernández, N.1; Lorenzano-Menna, P.2 Laboratorio de Farmacología de Receptores, Cat. Qca Medicinal, FFyB, UBA1 Laboratorio de Oncología Molecular, Universidad Nacional de Quilmes2 Las Rho GTPasas son una familia de proteínas pequeñas de unión a GTP implicadas en la transcripción de genes, reorganización del citoesqueleto y progresión del ciclo celular. Entre los 22 miembros de la familia se encuentra Rac1, cuya sobreactivación en células leucémicas está asociada a migración e invasión. El objetivo del presente trabajo es estudiar los efectos de un novel inhibidor de Rac1/GEF, ZINC69391, sobre distintos modelos de células leucémicas. Al evaluar sus efectos sobre la inhibición de la proliferación por reducción de MTS, observamos una inhibición máxima de la proliferación del 100%, tiempo y concentración dependiente con valores depCI50 de 4,57±0,02 en HL60, 4,44 ±0,03 en U937 y 4,56±0,02 en KG1A. Esto fue corroborado por conteo de células viables. Para evaluar apoptosis medimos la actividad enzimática de caspasa 3 a las 12h de tratamiento con 120 mM del inhibidor, esta fue de 18±1 veces respecto al control para HL60 y de 2,9±0,7 y 2,6±0,2 para KG1A y U937 respectivamente. Resultados similares fueron obtenidos a las 24h de tratamiento con 50mM de ZINC69391. Estos resultados fueron confirmados por Western Blot de caspasa 3 y PARP clivados. Ensayos de citometría de flujo mostraron que mientras que en células HL60 la marcación con AnexinaV fue positiva en el 52,9% de la población celular tratada con 50mM del inhibidor, en U937 fue del 16,5%. Para explicar el mecanismo por el cual el inhibidor provoca apoptosis en estos sistemas, medimos la producción de especies reactivas de oxígeno y observamos en todos los modelos, un incremento del 40% (p<0,05) luego de 5h de tratamiento.La expresión de Bcl2, evaluada mediante western blot, mostró ser mayor en U937 y KG1A que en las células HL60, lo que podría explicar las diferencias de susceptibilidad observadas en las distintas líneas. Estos resultados señalan a ZINC69391 como un compuesto con actividad antiproliferativa e inductora de apoptosis en modelos de leucemias agudas humanas. Información suministrada por el agente en SIGEVAPalabras Clave
DESEñO RACIONALPROTOTIPOS FARMACOLOGICOSPROTEINAS GLEUCEMIA