Producción CyT
Libro de resúmenes de la Reunión Anual de la Asociación Argentina de Microbiología - ROL DE LA PROTEÍNA DKSA EN LA RESPUESTA SEVERA EN Bradyrhizobium diazoefficiens Y SU INTERACCIÓN CON LA SOJA

Congreso

Autoría
Falduti, Ornella Agostina ; Colla, Delfina ; IGLESIAS, JULIÁN ANDRÉS ; Torres Tejerizo, Gonzalo Arturo ; Mongiardini, Elias Javier ; Pérez Giménez, Julieta
Fecha
2024
Editorial y Lugar de Edición
CAAM
Resumen Información suministrada por el agente en SIGEVA
Bradyrhizobium diazoefficiens es una bacteria capaz de desarrollar nódulos en las raíces de plantas de soja donde reduce nitrógeno atmosférico a amonio. Esta propiedad simbiótica es aprovechada en la producción de inoculantes para soja. Durante el desarrollo del nódulo, la bacteria debe superar la barrera de defensa de la planta y estreses oxidativos y nutricionales, disparando en consecuencia la respuesta severa (RS). Esta respuesta se encuentra... Bradyrhizobium diazoefficiens es una bacteria capaz de desarrollar nódulos en las raíces de plantas de soja donde reduce nitrógeno atmosférico a amonio. Esta propiedad simbiótica es aprovechada en la producción de inoculantes para soja. Durante el desarrollo del nódulo, la bacteria debe superar la barrera de defensa de la planta y estreses oxidativos y nutricionales, disparando en consecuencia la respuesta severa (RS). Esta respuesta se encuentra mediada por la síntesis de los nucleótidos guanosina tetrafosfato y guanosina pentafosfato ((p)ppGpp). El (p)ppGpp, junto con la proteína DksA, se unen a la ARN polimerasa, redireccionando el metabolismo hacia uno de supervivencia. En otros rizobios se demostró la importancia de DksA en la RS, así como en la capacidad de natación y formación de biofilms, afectando en consecuencia su interacción con las raíces de la planta huésped. A la luz de los antecedentes observados, nuestra hipótesis es que la proteína DksA tiene una implicancia en el metabolismo de B. diazoefficiens, lo que podría tener consecuencias en su interacción con la soja. Es por esto que nos planteamos como objetivo generar un mutante delecional en el gen dksA en B. diazoefficiens USDA110, evaluarlo fenotípicamente y dilucidar si la proteína DksA tiene un rol importante en la respuesta severa en este sistema.El mutante fue construido mediante la técnica de doble recombinación y, para su caracterización fenotípica, realizamos ensayos de curvas de crecimiento en medio complejo en conjunto con la cepa salvaje, no observándose diferencias en la cinética de crecimiento entre ambas cepas. A su vez, evaluamos la capacidad de supervivencia de la mutante mediante una curva de muerte en medio mineral libre de C y N, en donde tampoco se muestran diferencias significativas respecto a la cepa salvaje. Estudiamos su natación en medios semisólidos y su capacidad de formar biofilms en pocillos de PVC, observando nuevamente un comportamiento similar en ambas cepas. Estudiamos su fenotipo en simbiosis con plantas de soja (Glycine max) mediante ensayos de nodulación, donde se determinó el peso seco de la parte aérea como medida indirecta de la fijación simbiótica de N y se observó una disminución del mismo en aquellas plantas inoculadas con la cepa mutante. Sin embargo, se evidenció que esta cepa generó la misma cantidad de nódulos y del mismo tamaño que los de la cepa salvaje.Los resultados muestran que la proteína DksA no tendría implicancia en el crecimiento, la supervivencia, la capacidad de natación y formación de biofilms de B. diazoefficiens USDA110. Y, si bien la mutación no afectaría la capacidad de la bacteria de establecer una simbiosis con las raíces de la planta de soja, si perjudicaría la fijación simbiótica de nitrógeno. Más estudios serán necesarios para determinar si los nódulos generados por la mutante difieren de aquellos generados por la cepa salvaje.
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Palabras Clave
SIMBIOSISSOJABRADYRHIZOBIUMESTRES