Congreso
Autoría
Falduti, Ornella Agostina
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Colla, Delfina
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IGLESIAS, JULIÁN ANDRÉS
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Heredia, Juliana Belén
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Mongiardini, Elias Javier
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Torres Tejerizo, Gonzalo Arturo
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Pérez Giménez, Julieta
Fecha
2025
Editorial y Lugar de Edición
CAMAyA 2025
Resumen
Información suministrada por el agente en
SIGEVA
Bradyrhizobium diazoefficiens es una bacteria capaz de desarrollar nódulos en las raíces de soja,donde reduce N atmosférico a amonio. Una de las vías por la cual la bacteria puede detectar losflavonoides secretados por la planta es la del regulador transcripcional NodD1. Este reguladoractiva conjuntamente la transcripción de los genes nod, encargados de la síntesis de los factoresde nodulación, y la cascada del sistema de secreción de tipo...
Bradyrhizobium diazoefficiens es una bacteria capaz de desarrollar nódulos en las raíces de soja,donde reduce N atmosférico a amonio. Una de las vías por la cual la bacteria puede detectar losflavonoides secretados por la planta es la del regulador transcripcional NodD1. Este reguladoractiva conjuntamente la transcripción de los genes nod, encargados de la síntesis de los factoresde nodulación, y la cascada del sistema de secreción de tipo 3 (T3SS), el cual secreta proteínasinvolucradas en suprimir la respuesta de defensa del huésped y en la ampliación del rango dehuésped. Durante el desarrollo del nódulo, la bacteria debe superar barreras de defensa de laplanta, lo que provoca estreses oxidativos y nutricionales. Es en esta situación donde se podríaestar disparando la respuesta severa (RS) mediada por la acumulación de nucleótidos deguanosina, denominados colectivamente como (p)ppGpp. Estos son sintetizados, en B.diazoefficiens, por la proteína Rsh. En nuestro laboratorio contamos con una mutante insercionalen el gen rsh (rsh::Km), deficiente en la síntesis de ppGpp, la cual no indujo el T3SS enpresencia del flavonoide genisteína. En consecuencia, nos propusimos como objetivo estudiar larelación entre el disparo de la RS ante el estrés nutricional y la expresión del regulador nodD1,necesaria para el disparo de los genes de nodulación y del T3SS. Utilizando AlphaFold seanalizaron estructuralmente la proteína NodD1 y sus dominios a través de las bases de datosSMART, Pfam y CDD. Se encontró que contiene un dominio LysR, el cual tiene una homologíasignificativa con proteínas de unión periplásmica tipo 2 y está reportado que puede unirse alppGpp. Esto evidenciaría una posible relación entre los niveles de ppGpp y la activación deNodD1. Para evidenciar esta relación en B. diazoefficiens, se realizaron medidas de transcriptomediante RT-qPCR del gen nodD1, tanto en la cepa salvaje como en la mutante rsh::Km, encondiciones basales y luego de un estrés nutricional. Observamos un aumento en los niveles deexpresión de nodD1 bajo un estrés nutricional para la cepa salvaje en comparación con lamutante. En paralelo, se realizaron fusiones transcripcionales a GFP de la región promotora delgen nodD1, y se midió fluorescencia en ambas cepas y bajo las mismas condiciones a laspreviamente ensayadas, para confirmar la influencia del estrés nutricional en la expresión denodD1. Finalmente, se obtuvo una mutante delecional nodD1 en B. diazoefficiens, que seutilizará en ensayos de nodulación bajo estrés nutricional, para continuar con el estudio del rol dela RS en esta cascada de señalización y en la interacción bacteria-soja.
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Palabras Clave
BRADYRHIZOBIUMESTRESSOJASIMBIOSIS