Producción CyT
Congreso
Autoría
LEAL, CAMILA
;
Briea Gasca
;
Adiba azis
;
christina Lopez
Fecha
2024
Editorial y Lugar de Edición
Asociación Argentina de Microbiología
ISSN
978-987-48458-2-5
Resumen
Información suministrada por el agente en
SIGEVA
Lacticaseibacillus rhamnosus CRL 2244 SECRETA METABOLITOS CON ACTIVIDAD SINÉRGICACON ANTIBIÓTICOS -LACTÁMICOS CONTRA Acinetobacter baumannii RESISTENTES ACARBAPENEMESAutores: Leal Camila 1 , Gasca Briea 2 , Azis Adiba 2 , Lopez Christina 2 , Kirsten S. McManus 3 , CazorlaSI 1 , Salzameda Nicholas T 3 , Bonomo Robert A 4,5,6 , Raya Raúl 1 , Ramírez María Soledad 2 , RodriguezCecilia 11Centro de Referencia para Lactobacilos (CERELA), CONICET, Tucu...
Lacticaseibacillus rhamnosus CRL 2244 SECRETA METABOLITOS CON ACTIVIDAD SINÉRGICACON ANTIBIÓTICOS -LACTÁMICOS CONTRA Acinetobacter baumannii RESISTENTES ACARBAPENEMESAutores: Leal Camila 1 , Gasca Briea 2 , Azis Adiba 2 , Lopez Christina 2 , Kirsten S. McManus 3 , CazorlaSI 1 , Salzameda Nicholas T 3 , Bonomo Robert A 4,5,6 , Raya Raúl 1 , Ramírez María Soledad 2 , RodriguezCecilia 11Centro de Referencia para Lactobacilos (CERELA), CONICET, Tucumán, Argentina2Center for Applied Biotechnology Studies, Department of Biological Science, College of NaturalSciences and Mathematics, California State University Fullerton (CSUF) Fullerton, CA, USA3Department of Chemistry and Biochemistry, College of Natural Science and Mathematics, CSUF,Fullerton, CA, USA4Research Service and GRECC, Louis Stokes Cleveland Department of Veterans Affairs Medical Center,Cleveland, OH, USA5Departments of Medicine, Pharmacology, Molecular Biology and Microbiology, Biochemistry,Proteomics and Bioinformatics, Case Western Reserve University School of Medicine, Cleveland, OH,USA6CWRU-Cleveland VAMC Center for Antimicrobial Resistance and Epidemiology (Case VA CARES),Cleveland, OH, USAAcinetobacter baumannii resistente a los carbapenemes (CRAB) ha sido clasificado comopatógeno prioritario crítico por la OMS y los Centros para el Control y la Prevención deEnfermedades (CDC), debido a la limitada disponibilidad de opciones terapéuticas efectivas,urgiendo la necesidad de explorar enfoques innovadores para el tratamiento de la infecciónpor CRAB. Investigaciones previas del grupo han demostrado que, en condiciones de co-cultivo, Lacticaseibacillus rhamnosus CRL 2244 presenta una potente actividad antimicrobianacontra cepas CRAB. Además, ensayos de transwell demostraron que labacteria láctica secreta compuestos(s) activos al medio responsables de dicha actividad. Elobjetivo del presente estudio fue caracterizar los compuestos(s) activos secretados por Lcb.rhmanosus CRL 2244 utilizando medio condicionado libre de células (CFCM). Tratamiento conacetona fría y acetato de etilo fue utilizado para extraer compuestos orgánicos solubles delCFCM. Se realizó la caracterización funcional del CFCM y el extracto orgánico frente a cepasCRAB i) determinando la concentración inhibitoria mínima (CIM) por el método demicrodilución en caldo, siguiendo las normas del CLSI, ii) ensayos de sinergia entreconcentraciones sub-inhibitorias de compuesto(s) purificado(s) en placas de agar Muller-Hinton ajustado a cationes (CAMHA) y tira de ensayo de CIM de diferentes antibióticosutilizados para tratar infecciones por A. baumannii, iii) ensayos de citotoxicidad para evaluar laseguridad del compuesto(s), empleando líneas celulares de queratinocitos humano (HaCaT) yde macrófagos murinos (Raw 264.7) y evaluando la proliferación celular mediante el ensayo deMTT utilizando un kit comercial, y iv) HPLC del extracto orgánico. El efecto del CFCM en laexpresión de genes asociados a la patobiología de A. baumannii, se realizó a través de ensayoscuantitativos de reacción en cadena de la polimerasa con transcripción inversa (qRT-PCR).Finalmente, cepas CRAB expuestas a los compuestos activos de la bacteria láctica fueronsometidas al ensayo de nitrocefin, como una medida de evaluar la integridad de la superficiecelular. Los resultados obtenidos mostraron que Lcb. rhamnosus CRL2244 secreta uncompuesto con actividad antimicrobiana contra cepas CRAB, y actúa sinérgicamente conantibióticos -lactámicos del tipo carbapenemes, recuperando la actividad de estosantibióticos. La purificación mediante HPLC detectó un único pico correspondiente a unamolécula orgánica polar no peptídica de bajo peso molecular, con seguridad terapéutica tras laadministración a las líneas celulares evaluadas. Los compuestos antimicrobianos liberados porLcb. rhamnosus CRL 2244 inducen la sobreexpresión de genes implicados en la virulencia de A.baumannii, como aquellos asociados al catabolismo del fenilacetato, el metabolismo del hierroy la formación de biopelículas. Particularmente, el gen que codifica las proteínas CidA/LgrA,asociada a la muerte celular programada en ciertas bacterias, mostró una significativasobreexpresión. En adición, el ensayo de nitrocefin reveló la disrupción de la membrana en lascepas CRAB expuestas al compuesto antimicrobiano. Los resultados aquí presentados sugierenel uso potencial y prometedor de los compuestos liberados por Lcb. rhamnosus CRL2244 comoopciones de tratamiento alternativas y/o complementarias a las terapias actuales.
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Palabras Clave
bacterias ácido lácticasAcinetobacter baumanniicarbapenem resistentemetabolitos antimicrobianos