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AAIV 2021 - Los macrófagos derivados de monocitos caprinos permisivos a la replicación intracelular de Brucella melitensis 16M exhiben un aumento en la transcripción de IL-4 en respuesta a la infección in vitro.
Congreso
Fecha:
2021Editorial y Lugar de Edición:
FVETResumen *
Se abordó el análisis transcriptómico de la respuesta primaria de cultivos de macrófagos derivadosde monocitos caprinos clasificados como restrictivos (?R?) o permisivos (?P?) frente a laprimoinfección con Brucella melitensis cepa 16M, en busca de diferencias en la expresión decitoquinas y otros elementos involucrados en la respuesta inmune. Se obtuvieron macrófagos apartir de monocitos de sangre periférica de 8 caprinos libres de brucelosis, los cuales fueroninfectados con B. melitensis en una proporción de 10 bacterias por macrófago. Se cuantificaron lasUFC iniciales y 24 horas post-infección para determinar el índice de supervivencia bacterianaintracelular (UFC T24 /UFC T0 ). Cultivos simultáneos fueron lisados para la extracción del ARN 4 y 24 horaspost-infección. Se realizó una qPCR en tiempo real, cuyos resultados se analizaron por el método propuesto por Pfaffl. El valor de supervivencia intracelular de B. melitensis in vitro difirió entre grupos(p<0,01, prueba t), siendo la media del grupo ?P? 3,9 veces superior a la del grupo ?R?. Los cultivos ?R? internalizaron mayor cantidad de bacterias (UFC T0 p<0,0001, prueba t) y restringieron su replicación eficientemente a valores similares a los del grupo ?P? 24 horas post-infección. El desafío promovió en ambos grupos la expresión de elementos de respuesta de Tipo I (inducción de TNFα, IL-1β, y NOS2, 4horas post-infección; y de IL-12, IFNγ y NOS2, 24 horas post-infección*). El cambio en la expresión relativa de IL-4 fue superior en cultivos de macrófagos ?P? a la replicación intracelular del microorganismo con respecto a los cultivos restrictivos ?R? (p=0,043) (ANOVA para medidas repetidas). Se registró una tendencia similar para IL-10 (p=0,056). Esta expresión en conjunto de citoquinas inhibitorias del perfil de respuesta tipo I podría explicar, al menos en parte, la diferencia observada entre fenotipos en la capacidad de restringir la replicación intracelular de Brucella. Información suministrada por el agente en SIGEVAPalabras Clave
transcriptomacabrasbrucellosis