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XXVI Jornadas Anuales de la Sociedad Argentina de Biología - LOS INTERCAMBIADORES SODIO-PROTON sNHE y NHE1 CONTROLAN LA HIPERPOLARIZACIÓN DE LA MEMBRANA PLASMÁTICA DURANTE LA CAPACITACIÓN EN ESPERMATOZOIDES MURINOS
Congreso
Autoría:
Novero, Analia G. ; Torres Rodríguez, Paulina ; De la Vega Beltrán, José L. ; Schiavi-Ehrenhaus, Liza J. ; Luque, Guillermina M ; STIVAL, CINTIA ESTEFANÍA ; Gentile, Iñaki ; Santi, Celia M. ; Buffone, Mariano G. ; Darszon, Alberto ; Treviño, Claudia L. ; Krapf, DarioFecha:
2025Editorial y Lugar de Edición:
Sociedad Argentina de BiologiaResumen *
La capacitación espermática otorga a los espermatozoides la capacidad para fecundar después de la eyaculación. La hiperpolarización del potencial de membrana plasmática del espermatozoide (Em), promovida por la apertura de los canales de K+ SLO3, es un evento 54 clave asociado con la capacitación y se correlaciona con el éxito de técnicas de reproducción asistida en humanos. Evidencias previas mostraron la dependencia de SLO3 de la alcalinización e implicaron el papel del cAMP/PKA en este proceso. Este estudio tuvo como objetivo revelar los mecanismos moleculares que conducen a la hiperpolarización. Los espermatozoides de ratones WT y nulos (KO) para sNHE, Slo3 y CatSper fueron incubados en condiciones capacitantes con o sin inhibidores farmacológicos. Las mediciones de Em se evaluaron mediante fluorimetría poblacional, mientras que el pH se midió mediante microscopía de células individuales y citometría de flujo. La inhibición específica de PKA mediante sPKI no bloqueó la hiperpolarización de Em. Sin embargo, la inhibición de la síntesis de cAMP afectó este evento, siendo restaurado posteriormente mediante la adición de 8BrcAMP, lo que respalda el papel del cAMP en Em. Basándonos en la dependencia de Slo3 del pH intracelular, analizamos el papel de los intercambiadores NHE en Em. Los espermatozoides de ratones KO para el intercambiador de sodio-protón específico de espermatozoides (sNHE) no presentaron hiperpolarización, la cual no fue restaurada con 8BrcAMP, probablemente debido a la ausencia del dominio de unión a nucleótidos cíclicos (CNBD) en sNHE. Además, la inhibición farmacológica de un segundo intercambiador presente en los espermatozoides, NHE1, también bloqueó la hiperpolarización de la membrana, similar a lo observado en los ratones KO para el canal de calcio CatSper, es posible que debido a la estimulación de NHE1 por el calcio. Como era de esperar, un pulso de calcio intracelular promovió la alcalinización de los espermatozoides. En ambos casos, KO de CatSper e inhibición de NHE1, la hiperpolarización de Em fue restaurada por 8Br-cAMP. Nuestros resultados muestran que dos vías paralelas modulan sinérgicamente la alcalinización que conduce a la hiperpolarización: el cAMP a través de sNHE, probablemente mediante su CNBD, y NHE1, modulado por el Ca2+ derivado de CatSper, para finalmente alcanzar el umbral de alcalinización que promueve la activación de SLO3. Información suministrada por el agente en SIGEVAPalabras Clave
ESPERMATOZOIDESNHEHIPERPOLARIZACIÓNslo3CANALES IÓNICOSCAPACITACIÓN