Producción CyT
Congreso
Autoría
Paz, FA
;
PARELLADA, EA
;
Cornacchione, MV
;
Palma GA
;
CORIA, MARIA SUMAMPA
Fecha
2024
Editorial y Lugar de Edición
Independiente
Resumen
Información suministrada por el agente en
SIGEVA
La alfalfa (Medicago sativa L.) es un cultivo forrajero importante en la provincia de Santiago del Estero. En la última década, la alfalfa transgénica tolerante al herbicida glifosato® fue introducida ilegalmente en Argentina, provocando una gran contaminación de semillas. La presencia de este evento transgénico podría evaluarse mediante la amplificación en cadena de la polimerasa (PCR); para ello, es esencial contar con metodologías q...
La alfalfa (Medicago sativa L.) es un cultivo forrajero importante en la provincia de Santiago del Estero. En la última década, la alfalfa transgénica tolerante al herbicida glifosato® fue introducida ilegalmente en Argentina, provocando una gran contaminación de semillas. La presencia de este evento transgénico podría evaluarse mediante la amplificación en cadena de la polimerasa (PCR); para ello, es esencial contar con metodologías que nos permitan obtener una buena cantidad y calidad de ADN. El objetivo del trabajo fue evaluar la eficiencia de 3 métodos de extracción de ADN en diferentes tipos de tejido de alfalfa (semilla, hoja fresca, heno) y obtener plantas libres de eventos transgénicos J101 y/o J163 en el cv. Salinera INTA. Se realizó la extracción de ADN de 100 mg de cada muestra, con los protocolos: Kit Comercial (KC), Acetato de Potasio (AK) y Precipitación Salina con SDS (SDS). Se determinó la concentración y pureza del ADN mediante espectrofotometría, y la integridad mediante electroforesis en geles de agarosa. A su vez se determinó el porcentaje de amplificación para cada protocolo mediante PCR. Las determinaciones se realizaron por triplicado biológico y técnico. Posteriormente, se sembraron 600 semillas del cultivar. Con las plantas obtenidas, se conformaron 18 bulks, de 30 a 40 plantas cada uno, de las cuales se tomó una hoja trifoliada por planta y se analizó la presencia de los eventos mediante tiras reactivas y PCR. Los resultados sugieren que cada método de extracción se adapta mejor a un tipo de tejido: para heno el de SDS, para semilla el AK y para el tejido foliar fresco el KC. Los resultados de las tiras reactivas indicaron que el 11% de los bulks fueron positivos, mientras que el análisis de la PCR permitió detectar la presencia de los eventos en el 22% de los bulks. Las plantas negativas para la presencia de los eventos por ambos métodos fueron trasplantadas a campo. La técnica de PCR posee mayor sensibilidad para detectar los eventos transgénicos estudiados. El trabajo realizado permitió determinar el mejor método de extracción para cada tejido en alfalfa, y obtener un pool de plantas del cultivar Salinera INTA libres de los eventos transgénicos evaluados, para posterior multiplicación de semillas.
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Palabras Clave
GLIFOSATOOGMADN