Producción CyT
XV Jornadas de la Asociación Argentina de Inmunología Veterinaria, I Reunión de la Red Latinoamericana de Inmunología Veterinaria. - Rational design of multi-epitope immunogens for the production of anti-scorpion sera by reverse vaccinology of the venom of species with public health interest.
Congreso
Fecha:
2023Editorial y Lugar de Edición:
UNLResumen *
El establecimiento de poblaciones partenogenéticas de escorpiones sinantrópicos del género Tityus favorecido por el cambio climático y las condiciones habitacionales empobrecidas, ha incrementado la incidencia de alacranismo en los principales centros urbanos del país. Frente a una demanda creciente de antisueros para faboterapia, las fuentes naturales de antígeno presentan severas limitaciones de disponibilidad y estandarización por lo que el objetivo del trabajo fué diseñar in silico un inmunógeno multiepitope contra las principales neurotoxinas del veneno. Partiendo de 405 secuencias aminoacídicas (NCBI) de las especies de la región toxinológica III (sudeste de Brasil+Uruguay+Argentina) se seleccionaron por bibliometría 10 toxinas con mayor potencial patogénico en mamíferos (ligandos de canales de Na+ y K+). Combinando las estructuras 3D experimentales (PDB) o modeladas (Alfafold2 DB) con toxicología experimental (Pubmed) y predictores basados en redes neuronales (DiscoTope3, ClusPRO), se definieron 4 epítopes neutralizantes conservados en todas las especies y con amplia cobertura funcional. Para la construcción del ORF multiepitope se alternaron secuencias parciales de las toxinas Ts1, Ts2, Ts5 y Ts10 con 6 epítopes promiscuos TCD4 seleccionados mediante análisis in silico (NetMHCIIpan) empleando como receptores MHC-II los alelos DR1, DR2 y DR3 de los haplotipos más frecuentes en caballos criollos (IPD-MHC) a partir de una base de 75 péptidos empíricamente probados en caballo (IEDB). A modo de adyuvantes genéticos, se adicionó una secuencia de reconocimiento por TLR2 río abajo del péptido señal y por TLR4 en el extremo CO2-terminal. Sobre la secuencia del constructo maduro (escindido del péptido señal) se calculó PM (31155.77), PI (8.18) y solubilidad (0.41). La estructura 3D fué modelada (I-Tasser-MTD) para corroborar antigenicidad (DiscoTope3, ELiPRO), alergenicidad (AllerCatPRO) y realizar docking rígido proteína-proteína (ClusPRO) verificando la interacción del constructo contra TLR2/1(6NIG) y TLR4/ MD2(3VQ2). Este trabajo propone una nueva estrategia de diseño de inmunógenos para antivenenos de artrópodos. Información suministrada por el agente en SIGEVAPalabras Clave
REVERSE VACCINOLOGYINMUNOINFORMATICSFABOTHERAPYINMUNOGEN