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Academia de Ciencias de la Salud de Tucumán - INMUNOGLOBULINAS G (IgG) ANTI-SARS-CoV-2 OBTENIDAS A PARTIR DE PLASMA DE LLAMAS INMUNIZADAS
Congreso
Autoría:
Soliz-Santander, Silvana Estefanía ; Stagnetto A. ; Ploper D. ; Tomas Grau , R ; Ávila C. ; Cazorla S. ; Maldonado Galdeano C. ; Argañaráz M. ; Apichela S. ; Chehín R. ; VERA PINGITORE, ESTEBANFecha:
2022Editorial y Lugar de Edición:
Academia de Ciencias de la Salud de TucumánResumen *
A pesar de los esfuerzos mundiales para desarrollar diversos tratamientos para el SARS-CoV-2 todavía se requieren estrategias rápidas y eficaces. El dominio de unión a receptor (RBD) de la proteína Spike está involucrado en la entrada del coronavirus a la célula huésped y es por eso que la producción anticuerpos neutralizantes contra RBD tendrían gran relevancia. Los anticuerpos neutralizantes que interrumpen la interacción de RBD y ACE2 han estado bajo el foco de atención como un nuevo tratamiento para el COVID-19. Algunos animales, como las llamas, fabrican anticuerpos de cadena pesada que tienen un solo dominio variable (VHH) en lugar de los dos dominios variables (VH/VL) los anticuerpos convencionales. Estos VHH han demostrado potencial clínico y presentan ciertas ventajas como el reconocimiento de epítopes inaccesibles para los anticuerpos convencionales. Además, desde el punto de vista tecnológico, son más pequeños, presentan alta solubilidad, elevada estabilidad y resistencia al bajo pH.ObjetivoPurificar distintos isotipos de inmunoglobulinas G (IgG) anti-SARS-CoV-2 producidos tras la inmunización de dos llamas (Lama glama) con el dominio RBD de la proteína Spike del coronavirus. Metodología y ResultadosEl plasma de cada llama fue inyectado en una columna cromatográfica de afinidad (Proteína G), las distintas fracciones colectadas fueron analizadas mediante SDS-PAGE en condiciones no reductoras y los títulos anti-RBD determinados mediante un ELISA “in house”, desarrollado en nuestro establecimiento. Se obtuvieron títulos de 52000 y 13000 para las fracciones de IgG1 e IgG3 respectivamente. Posteriormente se preparó una columna de afinidad (HiTrap NHS-activated) para separar los anticuerpos policlonales monoespecíficos anti-RBD. A esta columna se le acopló covalententemente RBD producido en nuestro laboratorio lográndose una eficacia de acople del 97%, y obteniéndose los distintos isotipos de anticuerpos monoespecíficos anti-RBD (IgG1140kDa e IgG395kDa). ConclusiónSe logró obtener fracciones purificadas de los diferentes isotipos (IgG1 e IgG3) de anticuerpos con títulos elevados. Estos anticuerpos constituyen la base para la obtención de VHH y/o para evaluar su potencial uso como alternativa terapéutica o preventiva; lo que representa un notable aporte en la lucha frente al COVID-19 y un avance en el conocimiento y capacidades científicas instaladas localmente. Información suministrada por el agente en SIGEVAPalabras Clave
SARS-CoV-2COVID-19LAMA GLAMAINMUNOGLOBULINAS