Producción CyT
Congreso
Autoría
Fecha
2014
Editorial y Lugar de Edición
Sociedad Argentina de Espectrometría de Masas
Resumen
Información suministrada por el agente en
SIGEVA
Las melaninas son pigmentos oscuros sintetizados por un amplio espectro de organismos. Estos polímeros, químicamente complejos, cumplen roles de protección ante situaciones de stress y tienen propiedades de interés. Pseudocercospora griseola es un hongo patógeno de poroto (Phaseolus vulgaris) que se caracteriza por desarrollar micelio y esporas pigmentados. En estudios previos utilizando inhibidores específicos suplementados al medio de cultivo se deter...
Las melaninas son pigmentos oscuros sintetizados por un amplio espectro de organismos. Estos polímeros, químicamente complejos, cumplen roles de protección ante situaciones de stress y tienen propiedades de interés. Pseudocercospora griseola es un hongo patógeno de poroto (Phaseolus vulgaris) que se caracteriza por desarrollar micelio y esporas pigmentados. En estudios previos utilizando inhibidores específicos suplementados al medio de cultivo se determinó que el tipo de melanina que sintetiza este hongo es 1,8-dihidroxinaftaleno (DHN). El objetivo de este trabajo fue identificar los intermediaros claves de la vía de síntesis de la melanina en P. griseola utilizando MALDI-TOF MS (Matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry). Para ello, el hongo se cultivó sobre un medio basal y en presencia de 100 µg ml-1 de Triciclazole (inhibidor de las reductasas involucradas en la síntesis de melanina DHN) a 24°C en oscuridad durante 21 días. Los cultivos suplementados con Triciclazole mostraron una coloración diferente en el micelio y en el medio de cultivo como resultado de la acumulación de cromóforos anaranjados. La extracción de los metabolitos intermediaros a partir del micelio desarrollado en los dos medios se llevó a cabo con acetato de etilo durante dos periodos de tiempo (2 y 24 horas). Para medir los espectros MALDI-MS se utilizó como matriz ácido gentísico. Debido a que las soluciones aisladas de esas cepas poseen absorción a 350 nm, se registraron además espectros de masa UV-LDI, es decir sin el agregado de una matriz.En los espectros de masa realizados con los extractos obtenidos desde el micelio crecido en presencia de Triciclazole (tanto después de 2 y 24 horas de extracción) se identificó flaviolina, un producto de autoxidación del 1,3,8-trihidroxinaftaleno (1,3,8-THN), un intermediario clave en la síntesis de la melanina DHN. Se confirmó la estructura de flaviolina mediante espectros MS/MS. No obstante, este metabolito no se detectó en extractos derivados de cultivos control. Estos resultados confirman la naturaleza DHN de la melanina de este hongo.
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Palabras Clave
MELANINASDHNESPECTROMETRÍA DE MASAS