Caracterización de un anticuerpo monoclonal dirigido contra los receptores de la hormano de crecimiento humana

Tesis

Resumen *

El anticuerpo monoclonal (MAb) denominado R7B4 se generó a lo largo de la red idiotípica-antiidiotípica de ratones inmunizados con hormonas de crecimiento (GH) humanas y bovinas. El Ab se seleccionó sobre la base de que no reconocía la GH humana (hGH) ni insolubilizada ni en solución pero inhibió la unión de 125I-hGH a receptores de hígado de rata y conejo y de membranas de células Nb2. Dado que inhibía la mitogénesis de las células Nb2 estimulada por hGH, prolactinas o lactógenos placentarios, el MAb R7B4 se comportaba como un antagonista de las hormonas lactogénicas. Además, el Ab perjudicó la actividad proliferativa de la interleucina 2 (IL-2) en las células Nb2, así como el crecimiento de las células 7TD1, un hibridoma dependiente de interleucina 6 (IL-6) que no expresa receptores de GH. El MAb R7B4 marcado con biotina se unió específicamente a los microsomas de hígado de rata, y el Ab pudo reconocer las membranas de las células Nb2 y 7TD1 como se muestra en los experimentos de citometría de flujo. Sin embargo, la hGH no obstaculizó la unión del MAb, lo que indica que el Ab no imitaba el sitio de unión de la GH a los receptores. Los ensayos de inmunotransferencia indicaron que el hígado de rata y conejo, así como los antígenos de membrana de las células Nb2 reconocidos por MAb R7B4, eran similares a los revelados por un MAb dirigido a los receptores de prolactina. Además, MAb R7B4 fue capaz de detectar dos bandas que probablemente corresponden al receptor somatogénico en microsomas de hígado de conejo, así como tres proteínas diferentes en células 7TD1 que muestran pesos moleculares similares a los del complejo receptor de IL-6. Los resultados sugieren que MAb R7B4 se dirige a un epítopo compartido por receptores de hormonas lactogénicas y somatogénicas, IL-2 e IL-6. Hasta donde sabemos, estos datos son la primera evidencia experimental de la existencia de similitud estructural entre algunos de los receptores agrupados en la superfamilia de receptores de citoquinas. Información suministrada por el agente en SIGEVA