Detección y Caracterización molecular de Patógenos que afectan la salud humana, animal y vegetal.: 1) Identificación de agentes infecciosos mediante técnicas de Biología Molecular. 2) Identificación y posterior secuenciación de los fragmentos obtenidos de muestras positivas.

Technological service

Detail:

Identificación de patógenos en muestras biológicas remitidas por el cliente. El servicio está dirigido a Empresas, entidades encargadas de la sanidad humana, animal y vegetal.

Methodology:

A partir de diferentes muestras biológicas, aportadas por el solicitante, se realiza la extracción de ácidos nucleicos (ADN/ARN). Luego, mediante técnicas moleculares de amplificación (PCR/RT-PCR), se detectan de manera precisa, sensible y específica, secuencias nucleotídicas correspondientes a diferentes regiones de los genomas de los agentes en estudio. Para los agentes cuyo genoma es ADN, el mismo es obtenido de las muestras incógnitas, mediante un pre-tratamiento con buffer de lisis, y proteinasa K, y una posterior purificación del mismo, con el kit Qiaex II, según instrucciones del fabricante. Luego se realiza la PCR (Reacción en cadena de la polimerasa); utilizando oligonucleótidos específicos para la detección de: bacterias, virus, parasitos y hongos. Para los agentes cuyo genoma es ARN, se realiza en primer lugar una extracción del ARN con Trizol, (según instrucciones del fabricante); y luego una RT-PCR (Transcripción Reversa-Reacción en cadena de la polimerasa) en presencia de oligonucleótidos específicos para la detección de cada agente a estudiar. La reacción se realiza con el kit One Step (Qiagen). Junto con el material genético obtenido de las muestras a analizar, se utiliza en paralelo un control Positivo, el cual se sabe certeramente que posee el material genético con la secuencia de interés, y un control Negativo, que es agua. Cada par de oligonucleótidos posee su respectivo ciclado en el termociclador. Para poder visualizar los productos específicos, se realiza un gel de agarosa al 1,0% teñido con Sybr Safe y visualizado en un transiluminador. A posteriori, y en caso de solicitarlo el cliente, se realiza la secuenciación de los fragmentos (productos de PCR) obtenidos. Cualquier informe que sea entregado al solicitante no reviste carácter de certificación.