Transformación y amplificación de plásmidos utilizando bacterias electrocompetentes de alta eficiencia: Transformación y amplificacion de plásmidos. Batch o medio batch (15 o 7 muestras) se transforman en E.coli DH5-? por electroporación y luego se crece una de las colonias resultantes de cada muestra y amplifica el plásmido.

Servicio tecnológico

Detalle:

Se ofrece el servicio de amplificación de plasmidos mediante la transformación de E. coli electrocompetentes y la purificación por la técnica de "mini-prep"

Metodología:

A- Preparacion de bacterias electrocompetentes: A partir del cultivo de bacterias E. coli DH5#, se realiza una electroporación mediante la preparación de bacterias altamente eficientes usando el paso de centrifugación por densidad en glicerol/manitol. B. Amplificacion y purificación de plásmidos: A partir de los plásmidos aportados por el comitente, se realiza la preparación de plásmidos, la misma se realizará por el método standard (“mini prep”) según publicado. Se mide la concentración de plásmido por nanodrop y se verifica la integridad en geles de agarosa. Se entrega un tubo de microcentrífuga por muestra con 50 microlitros de solución acuosa del plásmido amplificado y la documentación correspondiente a la concentración e integridad (imágen del gel de agarosa).