Las modificaciones a realizar consisten en la fusión de los VHHs provistos a proteínas fluorescentes como GFP o mCherry, o el agregado de la región Fc de anticuerpos convencionales, o la generación de moléculas bivalentes mono o biespecíficas, uniendo el mismo o diferentes VHHs a través de linkers de diferentes tamaños. Para generar las diferentes construcciones se utilizarán vectores diseñados en nuestro laboratorio aplicando técnicas como clonado clásico o infusion.
Metodología:
Para modificar los VHHs seleccionados se utilizan plásmidos generados en el laboratorio que permiten subclonar el gen de interés en el plásmido deseado. Se pueden convertir VHHs monovalentes en bivalentes adicionando un linker de 5 ó 10 Glicinas-Serinas. Se puede agregar una secuencia de secreción y regiones CH2 y CH3 de anticuerpos convencionales. Se cuenta también con plásmidos que permiten agregar las proteínas GFP o mCherry.