Determinación de marcadores séricos de diabetes autoinmune y otros anticuerpos relacionados.: 4) Determinación por radiometría (RBA) del marcador sérico IAA, de diabetes autoinmune.

Servicio tecnológico

Detalle:

El anticuerpo anti insulina (IAA), dirigido hacia el respectivo antígeno presente en las células beta de los islotes pancreáticos, representa un marcador sérico específico de agresión autoinmune en la diabetes mellitus insulinodependiente, tipo 1. La aplicación práctica de este análisis en la Medicina Asistencial Diabetológica presenta un creciente interés por su valor predictivo y diagnóstico.

Metodología:

Test de unión de radioligando (RBA): El trazador [125I]insulina A14 se prepara a partir de insulina humana recombinante farmacéutica, purificada de sus conservadores por exclusión molecular, y de Na125I. La separación del derivado A14 se realiza mediante HPLC fase reversa. Luego el trazador (aprox. 10.000 cpm) se incuba con los sueros bajo análisis (30 l de cada uno) en una solución reguladora, durante 6 días a 4 ºC. Tras una etapa separativa con Proteína A-Sepharose, la actividad de los precipitados se determina en un contador gamma. El procesamiento de los resultados incluye datos obtenidos de una serie paralela de tubos conteniendo antígeno frío en exceso para estimar la unión inespecífica y sueros normales de control para establecer el valor de corte. Los resultados se expresan en unidades de B%.