Análisis de especificidad del reconocimiento biomolecular, cinética y termodinámica de las interacciones.

Servicio tecnológico

Detalle:

Estudios exploratorios por SPR (Surface Plasmon Resonance), llamada también técnica de biosensado óptico, para el diseño de los ensayos de unión: proteína - proteína (o glicoproteína), proteína - péptido, proteína - glúcidos, proteína - lípido, proteína - nucleótido, proteína - moléculas pequeñas. Diseño y protocolización de los ensayos y modelado de la interacción para el cálculo de los parámetros cinéticos y termodinámicos.

Metodología:

La caracterización de las interacciones moleculares por la tecnología del censado de resonancia de plasmones de superficie permite obtener señales del cambio de masa molecular sobre el sensor en tiempo real y sin necesidad de reporteros (tag) adicionales. Uno de los reactivos es inmovilizado químicamente o por captura específica en la superficie del sensor. Se lo denomina ligando (generalmente el consumo de "ligando" es de 2 a 5 microgramos por ensayo). El segundo reactivo, llamado "analito", se inyecta a distintas concentraciones y su consumo depende de la afinidad de la interacción y de su peso molecular. La concentración del analito debe estar determinada con precisión para obtener parámetros cinéticos representativos y describir la interacción ligando-analito, es decir, el mecanismo de formación del complejo. La interacción debe ser específica por lo que es necesario contar con controles negativos o positivos.