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Libro de Actas - El colesterol regula la expresión de la aquaporina-8 mitocondrial en células hepáticas humanas Huh-7
Congreso
Date:
2016Publishing House and Editing Place:
Editorial de la Sociedad Argentina de FisiologíaSummary *
La aquaporina-8 mitocondrial (mtAQP8) hepática puede funcionar como una peroxiporina facilitando la salida difusiva del peróxido de hidrógeno mitocondrial, el cual ha sido involucrado en la regulación de la colesterogénesis hepática. Debido a que el promotor del gen de la AQP8 posee elementos de respuesta a factores de transcripción SREBP (sterol regulatory element-binding protein) modulados por el colesterol, y que nuestros estudios previos indican que ratas con dieta hipercolesterolémica muestran reducida expresión de la mtAQP8, en este trabajo estudiamos el efecto de alteraciones en el contenido de colesterol sobre la expresión de mtAQP8 en células humanas derivadas de hepatocitos. Células Huh-7 fueron cargadas con colesterol utilizando el complejo metil-β-ciclodextrina (mβCD):colesterol, y depletadas de colesterol con mβCD en ausencia de suero fetal bovino. Los niveles de ARNm fueron medidos por qRT-PCR a las 8 h y la expresión proteica por inmunobloting a las 24 h. El incremento del colesterol celular (hasta un +92%) inhibió la activación proteolítica de los SREBP 1 y 2, y como consecuencia de ello, se redujo significativamente la expresión, a nivel ARNm y proteína, de la enzima clave de la síntesis del colesterol, 3-hidroxi-3-metilglutaril coenzima A reductasa (HMGCR). En estas condiciones, disminuyó significativamente la expresión de mtAQP8, tanto del ARNm (-70%; n=3; P < 0,05) como de la proteína (-64%; n=3; P < 0,05). Por el contrario, una reducción del colesterol celular del 36 ± 2% activó la proteólisis de los SREBP 1 y 2, y aumentó la expresión (ARNm y proteína) de la HMGCR. La expresión de mtAQP8 incrementó significativamente a nivel ARNm (+67%; %; n=3; P < 0,05) y proteína (+62%; n=3; P < 0,05). Los resultados sugieren que la mtAQP8 hepática humana es regulada transcripcionalmente por el colesterol vía SREBPs. Information provided by the agent in SIGEVAKey Words
AQUAPORINA-8 MITOCONDRIALCÉLULAS HUH-7COLESTEROL