Science and Technology Production
Congress
Authorship
Fabra Mariana C
;
Campagna Anabella A
;
SELLA, MARIA EUGENIA
;
Carranza-Martin Ana C
;
Nikoloff Noelia
Date
2024
Publishing House and Editing Place
Universidad de Buenos Aires
Summary
Information provided by the agent in
SIGEVA
La mejora en cantidad y calidad de embriones producidos in vitro es un objetivo continuo que tiene la producción in vitro de embriones (PIV). El CIV es uno de los pasos cruciales en la PIV en donde se produce el mayor descenso en las tasas de blastocistos. El desarrollo embrionario previo a la implantación bovina se divide en 2 fases de acuerdo con la AGE, crucial para una correcta llegada a blastocisto: menor AGE (mAGE) de 2 a 8 células; mayor AGE (MAGE) de 8 a 16 cé...
La mejora en cantidad y calidad de embriones producidos in vitro es un objetivo continuo que tiene la producción in vitro de embriones (PIV). El CIV es uno de los pasos cruciales en la PIV en donde se produce el mayor descenso en las tasas de blastocistos. El desarrollo embrionario previo a la implantación bovina se divide en 2 fases de acuerdo con la AGE, crucial para una correcta llegada a blastocisto: menor AGE (mAGE) de 2 a 8 células; mayor AGE (MAGE) de 8 a 16 células. Para mejorar tasas y calidad de los blastocistos una estrategia es añadir antioxidantes al medio de CIV. El AAL tiene conocidas propiedades antioxidantes con buenos resultados in vitro en distintas especies incluido el bovino. El objetivo fue evaluar el efecto de AAL en las etapas de AGE en el desarrollo y la calidad de embriones bovinos en el CIV. Se utilizaron ovocitos obtenidos de ovarios de frigorífico que se sometieron a las etapas de maduración in vitro en medio TCM199, fecundación in vitro (FIV) en medio TALP y CIV en medio SOF suplementado en atmósfera con 5%CO2 a 39°C y humedad a saturación, con 7%O2 durante el CIV. Contando la hora 0 el momento de la FIV, los tratamientos fueron a) Control 0 µM AAL; b) mEGA: 0-24h AAL 2,5 µM; c) MEGA: 24-72 h AAL 2,5 µM); d) EGA: 0-72 h AAL 2,5 µM. Se evaluó tasa de clivaje a las 48 h después de la FIV y tasa de blastocistos en los días 7, 8 y total (B7, B8 y BT). Se midió como parámetro de calidad el número total de células (NTC) de blastocistos utilizando tinción de Hoechst 33342. Se cultivaron un total de 2064 ovocitos y se obtuvo un total de 455 blastocistos. Se evaluaron 284 blastocistos en conteo de NTC. Tasas de clivaje, B7, B8 y BT se analizaron mediante distribución Beta, comparación de dos proporciones. El NTC se analizó mediante comparación bayesiana de dos medias adaptado al enfoque frecuentista de la distribución Normal. Se consideró diferencia cuando P<0.05. Los datos fueron analizados con Software RStudio. Nuestros resultados indicaron que durante mEGA no hubo diferencias en las tasas de clivaje (C 81.3%, AAL 78.9% P=0.37). La tasa de BT aumenta en AAL (C 24.9% AAL 29.8% P=0.01). Durante MEGA no hubo diferencias en las tasas de clivaje (C 75.6% AAL 78.8% P=0.22) ni en las tasas de B7, B8 y BT (P=0.33; P=0.48; P=0.27) Durante el tratamiento en EGA el clivaje disminuye en AAL (C 75.1% AAL 65.6% P=0.02) y disminuye en B7 (C 20.3% AAL 9.7% P=0.01) y BT (C23.7% AAL 15.3%P=0.01) respecto al control. En cuanto al NTC, en mEGA AAL aumentó en B8 (C n=34 AAL n=22 P=0.04) y fue menor en B7 en AAL que el control (C n=40 AAL n=30 P=0.01) mientras que BT no difirió entre tratamientos (C n=74 AAL n=52 P=0.32). En MEGA AAL aumentó en B7 (C n=43 AAL n=47 P=0.06) y BT (C n=65 AAL n=61 P=0.03). Durante EGA no hubo diferencias en AAL (P<0.12). Concluimos que AAL es beneficioso solo en periodos cortos de tiempo. Sugerimos podría actuar activando la transcripción de genes vinculados con la calidad embrionaria. Se realizarán futuros trabajos.
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Key Words
GenomaEmbrionesCultivoAcido Alfa Lipoico