Science and Technology Production

Inmunoensayo tipo ELISA para la detección del antígeno M de Histoplasmosis capsulatum en muestras clínicas

Technical Report

Authorship:

ABUD, JULIÁN ELÍAS ; Cabeza M. ; Rodríguez, H. A. ; García-Effron G.

Summary *

Desarrollamos un inmunoensayo tipo ELISA (Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay)basado en la detección específica de la glicoproteína M de H. capsulatum en muestras de orina para eldiagnóstico rápido y preciso de Histoplasmosis. El problema que abordamosestá referido a las limitaciones de los métodos disponibles en nuestro paíspara el diagnóstico de Histoplasmosis. Los métodos serológicos más empleadospara la detección de anticuerpos son inmunodifusión (ID u Ouchterlony),fijación del complemento (CF) e imunoensayos enzimáticos (EIA). El antígenocomúnmente utilizado en estas pruebas es histoplasmina (HMN), un filtradosoluble del cultivo en fase micelial de H. capsulatum. El uso de la HMNpara la detección de anticuerpos (Acs) está limitado por su baja sensibilidad yespecificidad, particularmente, en inmunocomprometidos, y además los métodosactuales para su producción requieren mucho tiempo y son problemáticos. Delos kits disponibles comercialmente, los más difundidos son los desarrolladospor las firmas Immuno-Mycologics (IMMY) y MiraVista Diagnostics. Estosensayos están basados en la detección de antígenos polisacáridos de la paredcelular por lo que también presentan reacción cruzada con otros géneros dehongos dimórficos; además utilizan anticuerpos específicos obtenidos contraantígenos de cepas circulantes en otras regiones geográficas. Debido a queestos kits son importados, su costo comercial es muy elevado por lo que siguen siendo de muy difícil acceso ydisponibilidad en nuestro país. Disponemos de un inmunoensayo tipo ELISA Sándwich de producción local, basado enla detección específica del antígeno proteicos M de H. capsulatum, con mejores prestaciones deespecificidad y sensibilidad que los kits comerciales disponibles. Actualmente no existen métodosque se basen en la determinación específica de la glicoproteína M de H. capsulatum en muestras de relevanciaclínica o sanitaria. Además, los MAbs empleados son potencialmentetransferibles a un formato del tipo point-of-care, como ensayos de Inmunocromatografíade Flujo Lateral (LFA). Information provided by the agent in SIGEVA