Science and Technology Production
Congress
Authorship
SERBENT, MARÍA PILAR
;
María Daniela Rodríguez
;
Carla Fermanelli
;
Ivana Magario
;
Clara Saux
Date
2023
Publishing House and Editing Place
INTA General Cabrera
ISSN
2718-9090
Summary
Information provided by the agent in
SIGEVA
La agricultura convencional deja pasivos ambientales a escala global. En reiteradas ocasiones los agroquímicos empleados permanecen en el ambiente demandando soluciones eficientes para su remoción. Además, millones de toneladas de biomasa excedente son generadas anualmente. Los hongos de pudrición blanca (HPB) producen enzimas que pueden ser usadas en el tratamiento de efluentes con residuos de agroquímicos. En estado libre las enzimas presentan inestabilidad ...
La agricultura convencional deja pasivos ambientales a escala global. En reiteradas ocasiones los agroquímicos empleados permanecen en el ambiente demandando soluciones eficientes para su remoción. Además, millones de toneladas de biomasa excedente son generadas anualmente. Los hongos de pudrición blanca (HPB) producen enzimas que pueden ser usadas en el tratamiento de efluentes con residuos de agroquímicos. En estado libre las enzimas presentan inestabilidad y una alternativa para su recuperación catalítica es inmovilizarlas. Como los soportes sintéticos para inmovilización de enzimas son caros existe un interés en explorar el uso de materiales de bajo costo como, por ejemplo, la biomasa excedente de las actividades agrícolas. En Argentina la producción de maní genera, anualmente, un volumen de cáscara de maní (CM) que supera las 250 mil toneladas. El objetivo de este trabajo fue evaluar el uso de CM y su biocarbón (BCM) como soportes de la enzima fúngica lacasa (E). Esta enzima fue obtenida a partir del cultivo (14 días, 28°C) de Phlebia brevispora BAFC 633 en medio líquido compuesto por extracto de malta (1,27% P/V), extracto soluble de maíz (5% V/V) y CuSO4 (0,5 mM). La CM fue lavada con agua destilada, secada en estufa a 105 °C hasta peso constante y molida hasta obtener un tamaño de partícula < a 3,35 mm. Para la obtención de biocarbón (BCM), la CM fue sometida a un proceso de pirólisis (500 °C por 10 min, bajo 60 mL min-1 de flujo de nitrógeno). Se colocaron 2 g de cada soporte y 5 mL de solución de lacasa (concentración 4437 U L-1) en Erlenmeyers de 100 mL para incubación (30°C y 150 rpm). Luego de 10 h se vertió el contenido de los Erlenmeyers en tubos falcon (50 mL) para centrifugación (5 min a 700 rpm). Se desechó el sobrenadante, se añadieron 3 mL de tampón acetato sódico 0,1 M (pH 3,6) a los tubos y se mezcló en un vórtex durante 10 segundos, y luego se centrifugaron a 700 rpm durante 5 minutos. Tras desechar el sobrenadante, se transfirieron 0,5 g de soporte húmedo a Erlenmeyers limpios de 100 mL para la determinación de actividad lacasa usando 10 mL de una solución de 2,6-dimetoxifenol (DMP) 5 mM en buffer acetato de sodio 0,1 M (pH 3,6). Los ensayos se realizaron por duplicado. El cambio de la absorbancia se monitoreó por espectrofotometría a 469 nm (ε469 (DMP) = 27,5 mM−1cm−1) a los 3, 5 y 7 minutos de reacción. La actividad enzimática se expresó en unidades enzimáticas por gramo de soporte (U g-1), donde 1 U es equivalente a 1 µM min-1 de reactivo convertido a 30° C. Los datos fueron comparados mediante análisis de la varianza (ANOVA) y test de Tukey. Los valores de lacasa soportada variaron entre 41,97 y 103,27 U g-1. Con excepción del tiempo 5 (F = 48,41; p = 0,0200), no se observaron diferencias significativas en los valores promedios de actividad enzimática de lacasa inmovilizada en CM y BCM en las lecturas de 3 (F = 0,16; p=0,7241) y 7 minutos (F = 0,70; p=0,4896).
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Key Words
CÁSCARA DE MANÍINMOVILIZACIÓN DE ENZIMASHONGOS DE PUDRICIÓN BLANCA