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Determinación del número de bacterias pertenecientes algún grupo de interés (heterótrofas, productoras de ácido, bacterias anaeróbicas o reductoras de sulfato) presentes en una muestra de agua
Methodology
Para determinar el número bacterias viales se realizan 8 diluciones decimales seriadas de la muestra de agua a investigar en frascos de 10 mL conteniendo 9 mL del medio de cultivo apropiado según el grupo bacteriano de interés. Los frascos (tipo penicilina) están cerrados con tapón de goma y virola metálica y esterilizados en autoclave a 121°C durante 15 minutos. Las diluciones se realizan por duplicado, en condiciones de esterilidad en banco de flujo laminar empleando jeringa con aguja estéril...
Para determinar el número bacterias viales se realizan 8 diluciones decimales seriadas de la muestra de agua a investigar en frascos de 10 mL conteniendo 9 mL del medio de cultivo apropiado según el grupo bacteriano de interés. Los frascos (tipo penicilina) están cerrados con tapón de goma y virola metálica y esterilizados en autoclave a 121°C durante 15 minutos. Las diluciones se realizan por duplicado, en condiciones de esterilidad en banco de flujo laminar empleando jeringa con aguja estériles.
Los medios de cultivo a utilizar, según el grupo bacteriano de interés son:
Para Bacterias Reductoras de Sulfato (BRS) : medio B de Postgate.
Para bacterias heterótrofas (BH): Caldo nutritivo
Para bacterias productoras de ácido (BPA): Caldo Dextosa-Rojo de fenol
Para bacterias Anaerobias: Caldo tioglicolato
La salinidad de los medios se ajusta acorde a la salinidad del agua a analizar.
La temperatura de incubación de los frascos inoculados estará dentro del rango de ±5°C de la temperatura del agua registrada cuando se tomó la muestra.
Los frascos para BH que se enturbian entre 1 y 14 días se anotarán como positivos. Los frascos para BPA además de la turbidez se considerará un cambio de color de rojo a amarillo. Estos viales pueden ser descartados después de 14 días de incubación.
Los frascos para BSR que presenten ennegrecimiento se considerarán positivos. Estos frascos se incuban 28 días.
Los frascos para Anaerobicas se incuban 1 semana y consideran positivos para bacterias anaeróbicas cuando aparece trubidez en la parte inferior del tubo.
Los resultados se entregarán al interesado mediante un informe final.
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